質粒的制備、提取一
背景( 1 ): 質粒是一種雙鏈共價閉合的環狀 DNA ,是染色體以外的穩定遺傳因子。已經在細菌、真菌以及部分動植物細胞中發現質粒,以細菌中存在質粒最為普遍。質粒的制備與提取
DNA定量測定-Feulgen反應一
實驗步驟 1.切片經脫蠟入水。 2. 用 1mol/L HCl 浸洗。 3. 切片放入 60 ℃預熱的 1mol/L HCl 內 8min 。 4. 室溫下 1mol/L HCl 浸洗。 5. 蒸餾水浸洗 2 次,每次 5min. 6. 加入席夫液,于室溫反應 30-60
熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)
雜交所用的探針大致可以分類三類:1)染色體特異重復序列探針,例如α衛星、衛星III類的探針,其雜交靶位常大于1Mb,不含散在重復序列,與靶位結合緊密,雜交信號強,易于檢測;2)全染
多藥抗藥基因的表達實驗
多藥抗藥基因的表達實驗是通過反轉錄和PCR的方法來檢測特定基因的過度表達。 實驗方法原理 大多MDR細胞膜上出現MDR-1基因及其基因產物P-糖蛋白過度表達。
質粒的制備、提取十一
三、 質粒提取 (三) 質粒的純化 附錄: 1 OD260 和 OD280 的比值表示質粒的純度。比值大于 1.8 ,說明純化產物的純度達到了 90% 。純化好的質粒可用于轉染實驗,一般純化步驟在細胞間
抗EBV抑制劑研究新進展
疹病毒(Epstein-Barr virus,EBV)的潛伏感染能夠誘導伯基特淋巴瘤、鼻咽癌、胃癌和霍奇金淋巴瘤等多種淋巴細胞源性和上皮細胞源性的惡性腫瘤的產生。在全球范圍內,有90%以上的人感染過EBV。因
小鼠胚胎干細胞培養實驗步驟
1、一般培養——保持胚胎干細胞處于未分化狀態 培養基 細胞復蘇 凍存細胞 明膠包被 細胞傳代 2 、體外分化 培養基:包被有多聚鳥氨酸/纖維結合蛋白的培養板(使用或
蛋白質免疫印跡(Western Blot,WB )
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測的方法。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。
從動物肝臟中提取DNA
在濃氯化鈉(1―2mol/L)溶液中,脫氧核糖核蛋白的溶解度很大,核糖核蛋白的溶解度很小,在稀氯化鈉(0.14 mol/L)溶液中,脫氧核糖核蛋白的溶解度很小,核糖核蛋白的溶解度很大。因此,可
質粒的制備
四、 培養基配方 1. LB 液體培養基 100ml 配方如下: 胰蛋白胨 1g 酵母提取物 0.5g NaCl 1g DDW 定容 100ml 2. LB 固體培養基 100ml 配方如下: 胰蛋白胨 1g 酵母提取物 0.5g NaCl 1g 瓊脂粉 1.5g DDW 定容