動物RNA提取
利用,試劑,試劑盒提取RNA
總RNA提取實驗
總RNA提取可以:(1)獲得高純度、高質量的總RNA;(2)可以滿足生物學下游實驗Northern Blot、核酸酶保護實驗、RT-PCR、qRT-PCR 和陣列分析所需 實驗方法原理
RNA干擾(轉錄后基因沉默)實驗
siRNA不僅能引導RISC切割同源單鏈mRNA,而且可作為引物與靶RNA結合并在RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRP)作用下合成更多新的dsRNA,新合成的dsRNA再由Dicer切割產生大量的次級siRNA,從
TRIzol RNA提取方法
Trizol是一種新型總RNA抽提試劑,采用變性劑即內含異硫氰酸胍酚和β-巰基乙醇等變性物質,能迅速破碎細胞,抑制細胞釋放出的核酸酶。
siRNA表達載體的構建
要使用這類載體,需要訂購2段編碼短發夾RNA序列的DNA單鏈,退火,克隆 到相應載體的pol III 啟動子下游。由于涉及到克隆 ,這個過程需要幾周甚至數月的時間,同時也需要經過測序以保
RNA干擾(轉錄后基因沉默)實驗
病毒基因、人工轉入基因、轉座子等外源性基因隨機整合到宿主細胞基因組內,并利用宿主細胞進行轉錄時,常產生一些dsRNA。宿主細胞對這些dsRNA迅即產生反應。其胞質中的核酸內切酶
熒光素酶及其報告基因的應用和檢測(四)
三 熒光素酶報告基因 2 報告基因簡單實驗流程 構建包含有報告基因的質粒 將構建好的質粒轉染細胞 提供相應的刺激(誘導) 檢測報告基因 數據分析 3 熒光素酶作為報告基因的優勢
熒光素酶及其報告基因的應用和檢測
二 熒光素酶 熒光素酶( Luciferase )是生物體內催化熒光素 (luciferin) 或脂肪醛 (firefly aldehyde) 氧化發光的一類酶的總稱 , 來自于自然界能夠發光的生物。 自然界存在的熒光素酶來自螢火
細胞中mRNA原位雜交技術(二)
實驗原理及技術背景二: 原位雜交可分為菌落原位雜交和組織原位雜交。菌落原位雜交是將細菌從培養平板轉移到硝酸纖維素濾膜上,然后將濾膜上的菌落裂解以釋放 DNA 。將 DNA 烘干
細胞中mRNA原位雜交技術(一)
實驗原理及技術背景二: 原位雜交可分為菌落原位雜交和組織原位雜交。菌落原位雜交是將細菌從培養平板轉移到硝酸纖維素濾膜上,然后將濾膜上的菌落裂解以釋放DNA。將DNA烘干固定